多囊卵巢综合征代谢特征及其与非酒精性脂肪肝的关系

目的:探讨育龄期与青春期多囊卵巢综合征(PCOS)患者的临床表现、内分泌与代谢特点以及与非酒精性脂肪肝的相关性,分析伴和不伴非酒精性脂肪肝对多囊卵巢综合征患者代谢指标的影响。方法:总结分析2008~2009年就诊于南京医科大学第一附属医院内分泌科的50例PCOS患者和非P-COS患者50例的临床资料,描述其临床表现、内分泌与代谢特点。比较两组患者NAFLD、胰岛素抵抗(IR)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)升高发生情况及一般临床参数。结果:50例PCOS患者中育龄期与青春期患者分别有34例和16例,主诉有月经稀发、无排卵、不育,高雄激素表现包括多毛、痤疮、脂溢性脱发和高雄激素血症,代谢紊乱表现包括肥胖或超重、高胰岛素血症,糖尿病或糖耐量异常,高血压,非酒精性脂肪肝和血脂紊乱。育龄期患者中按不同方法计算IR者占25.6%~41.2%。青春期患者中按不同方法计算的IR者占40.8%~50.6%。PCOS组NAFLDI、R、ALT升高的发生率与非PCOS对照组比较显著增高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:PCOS是涉及多系统的疾病,要重视PCOS患者,特别是青春期患者的代谢综合征的筛查与诊治。NAFLD在PCOS患者中患病率高。PCOS、NAFLD两种疾病在临床上存在相关性。     

羟基喜树碱联合依托泊苷对人Tenon囊成纤维细胞凋亡的影响及其机制

背景研究表明,羟基喜树碱（HCPT）和依托泊苷（VP-16）均能诱导人Tenon囊成纤维细胞（HTFs）的凋亡,但这两种药物联合应用对体外培养的HTFs是否有协同作用尚不明确。目的观察HCPT与VP-16联合应用后在促进体外培养的HTFs凋亡方面是否有协同性,并探讨其作用机制。方法人眼Tenon囊成纤维组织取自江苏省人民医院眼库,采用组织块培养法培养和传代HTFs,采用免疫组织化学法检测HTFs中波形蛋白的表达。第4代HTFs接种于96孔板,分别将不同质量浓度的HCPT（1、5、10、50、100mg／L）、VP-16（0．6、2．5、5．0、25．0、50．0mg／L）、HCPT＋VP-16（质量比为2：1,终质量浓度分别为0．80、3．75、7．50、37．50、75．00mg／L）加入细胞培养孔处理24h,用CCK-8法检测各组药物对细胞增生的抑制率。将HTFs分为空白对照组、HCPT（50mg／L）处理组、VP-16（25mg／L）处理组、HCPT＋VP-16（37．5mg／L）处理组,药物处理24h后用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率。提取细胞内总蛋白,采用Westernblot法检测各药物处理组细胞内caspase-3、活化型caspase-3、bax、bcl-2、JNK、p-JNK、Akt、p-Akt的表达水平。结果培养的细胞呈多边形或不规则形,波形蛋白表达阳性。不同质量浓度HCPT、VP-16和HCPT＋VP-16作用24h后,随着药物质量浓度的增加,对HTFs增生的抑制率增加,差异均有统计学意义（HCPT：F=41．34,P=0．00;VP-16：F=62．60,P=0．00;HCPT＋VP-16：F=46．77,P=0．00）,HCPT处理组、VP-16处理组和HCPT＋VP-16处理组药物的半数抑制浓度（IC50）分别为80．99、27．93、19．81mg／L,HCPT与VP-16联合应用的合并指数（cI）为0．399,表明VP-16和HCPT具有强协同作用。空白对照组、HCPT处理组、VP-16处理组和HCPT＋VP-16处理组HTFs的凋亡率分别为（4．87±0．78）％、（11．20±1．94）％、（12．67±1．51）％和（19．77±2．01）％,差异有统计学意义（F=18．23,P〈0．01）,其中HCPT处理组、VP-16处理组和HCPT＋VP-16处理组HTFs凋亡率较空白对照组明显升高,差异均有统计学意义（q’=15．67、16．32、26．88,P〈0．01）。Westernblot法检测结果表明,与空白对照组相比,HCPT处理组、VP-16处理组和HCPT＋VP-16处理组HTFs中活化型easpase．3、bax、p-JNK表达的灰度值明显增加,差异均有统计学意义（P〈0．01）,且HCPT＋VP-16处理组HTFs中上述各因子表达的灰度值较HCPT处理组、VP-16处理组明显增加,差异均有统计学意义（P〈0．01）,而easpase-3、JNK、Akt的表达无明显变化。与空白对照组比较,bcl-2、p-Akt在HCPT处理组、VP-16处理组和HCPT＋VP-16处理组HTFs中的表达量明显下降,HCPT＋VP-16处理组较HCPT处理组、VP-16处理组的表达量明显减少,差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论单独使用HCPT、VP-16均能诱导体外培养的HTFs凋亡,其作用均呈剂量依赖性,HCPT与VP-16联合应用有强协同作用。HTFs中p-JNK、bax的表达上调和p-Akt、bcl-2表达的下调参与联合用药引起的协同效应。     

中国儿童慢性肾脏病-矿物质与骨异常诊治循证指南（2021版）计划书

近年来,中国临床实践指南制订和发表的数量逐渐增多,但其质量良莠不齐,原因众多。计划书是指南制定的行动纲领和实施计划,一份结构完整、撰写清晰的计划书,对保障指南制订的科学、透明和规范方面发挥着重要作用。在开展临床试验和系统评价之前,撰写与发表相应的计划书,已被研究者广为接受,并且有对应的报告规范可循,但指南的计划书才刚起步。兰州大学GRADE中心、宁波诺丁汉GRADE中心、北京GRADE中心、复旦大学GRADE中心联合倡议,指南制定者,基于指南计划书的理念,推广计划书的传播和应用。《中国循证儿科杂志》将连续分期刊发27篇具有一定代表性的计划书,供指南制订者参考和借鉴。     

最小努力(惰性)原则与慢性病预防行为选择

目的:探讨长链非编码RNA MEG3在胃癌组织及细胞系中的表达水平,以及过表达MEG3对胃癌细胞增殖能力的影响,并探索其可能的作用机制?方法:用定量反转录PCR(qRT-PCR)技术检测胃癌组织及细胞系中MEG3的表达水平;通过转染pcDNA-MEG3上调MEG3的表达水平,并通过qRT-PCR检测转染效率?用MTT和克隆形成试验检测上调MEG3的水平对BGC-823细胞和MGC-803细胞的增殖能力的影响,Western blot检测这两种细胞中上调MEG3的水平对p53蛋白的表达水平的影响?结果:相比正常胃组织及细胞,在胃癌组织和细胞中MEG3的表达出现显著下调,SGC7901?MGC-803和BGC-823细胞中MEG3的表达水平分别是正常胃上皮细胞GES-1中的73.6%?42.0%和27.1%(P < 0.05)?BGC-823细胞和MGC-803细胞中转染pcDNA-MEG3能显著上调MEG3的表达,MEG3的表达水平分别为对照组的252倍和311倍(P < 0.05);MTT和克隆形成试验显示,上调MEG3的表达能降低BGC-823细胞和MGC-803细胞的增殖能力?Western blot实验显示,转染了pcDNA-MEG3的MGC-803和BGC-823细胞中p53的表达相较对照组中显著增加?结论:胃癌组织及细胞中MEG3的表达下调,且这可能通过抑制p53蛋白的激活从而促进胃癌细胞增殖,影响胃癌的发生和发展?     

新城疫病毒D90株对乳腺癌MCF－7细胞作用的实验研究

目的:国内外研究表明,新城疫病毒在体内外对多种肿瘤具有明显抑制作用?本研究旨在探讨新城疫病毒D90株体外对乳腺癌MCF－7细胞的作用及可能机制?方法:CCK－8法检测MCF－7细胞增殖抑制;光学显微镜及DAPI染色观察D90株对MCF－7细胞形态学影响;流式细胞术检测MCF－7细胞凋亡率;Western blot检测MCF－7细胞凋亡相关蛋白的表达情况?结果:D90株对MCF－7细胞具有显著抑制作用并呈浓度和时间依赖性;D90株能够诱导MCF－7细胞凋亡并调节凋亡相关蛋白的表达,包括上调Bax蛋白?下调Bcl－2蛋白,并促进Caspase－3和 Caspase－9的裂解活化?结论:D90株能够调节凋亡相关蛋白的表达,并促进Caspase－3和 Caspase－9的裂解活化,通过线粒体途径诱导MCF－7细胞凋亡并呈浓度和时间依赖性?     

miR-194对非小细胞肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药性的影响

目的:探讨microRNA-194(miR-194)对非小细胞肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药性的影响及其可能的作用机制?方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测非小细胞肺癌耐药细胞A549/DDP及其亲本细胞株A549中miR-194的表达差异,并在A549/DDP细胞中转染miR-194-inhibitor后检测miR-194的表达变化;应用MTT法?克隆形成实验?流式细胞术检测转染后A549/DDP细胞对DDP的敏感性?细胞增殖能力及凋亡变化;Western blot检测转染后A549/DDP细胞中Bax和Bcl-2的表达变化?结果:miR-194在耐药细胞A549/DDP中的表达量显著高于其亲本细胞株A549(P < 0.05),A549/DDP在转染miR-194-inhibitor 24 h后miR-194的表达水平较对照组显著下降(P < 0.05)?抑制miR-194表达后,相对于对照组,DDP对转染miR-194-inhibitor的A549/DDP细胞的半数抑制浓度(half inhibition concentration,IC50)减低(P < 0.05),转染miR-194-inhibitor的A549/DDP细胞增殖能力减弱,经DDP处理后凋亡细胞增多(P < 0.05)?Western blot结果显示,与对照组相比,转染miR-194-inhibitor的A549/DDP细胞Bax表达水平升高,Bcl-2表达水平降低?结论:miR-194可能通过抑制细胞凋亡,上调Bcl-2蛋白及下调Bax蛋白表达而增加A549/DDP细胞对DDP的耐药性,抑制miR-194的表达可逆转A549/DDP细胞的耐药性?     

一体化医患沟通教育模式在临床医学教学中的应用效果初探

目的：探讨一体化医患沟通教育模式应用于临床医学教学中的效果.方法：选取南京医科大学临床医学两个班级共60人,分为一体化教育模式组（30人）和传统教学模式组（30人）.选取南京医科大学第一附属医院骨科单节段腰椎间盘突出症患者30例,使用统一的医患沟通内容和满意度量表.结果：两组年龄、性别及专业知识掌握程度无明显差异（P＞0.05）;在完成沟通内容的时间上,一体化组为（20±9） min,而传统组为（36±12） min（P ＜0.05）;在患者满意度量表中,一体化为（4.4士0.9）分,而传统为（2.9±0.6）分（P＜0.05）.结论：一体化医患沟通教育模式可有效提高医患沟通教学效果.     

CABG术前单次他汀负荷对心肌特异性miRNA的调控作用

目的：探讨CABG术前单次他汀负荷对心肌特异miRNA（miRNA-1、miRNA-133、miRNA-208、miRNA-499）表达的影响。方法 CABG患者术前12h随机分为两组：A组常规服用20 mg阿托伐他汀,B组术前单次服用80 mg阿托伐他汀。术中随机获取右心耳组织,A组5例,B组3例,健康人右心耳组织4例作为C组,荧光定量聚合酶链式反应检测心脏特异性miRNA的表达量（miRNA-1,miRNA-133,miRNA-208和miRNA-499）。结果miRNA-1,miRNA-133a,miRNA-133b,miRNA-208a,miRNA-208b,miRNA-499a-3p,miRNA-499a-5p,和 miRNA-499b-3p在三组中的表达无差异。与A组和C组相比,miRNA-499b-5p在B组中明显高表达。结论 CABG术前单次大剂量他汀负荷的心肌保护作用,其机制之一可能通过上调miRNA-499b-5p实现。     

胰腺癌细胞株PANC-1中肿瘤干细胞的体外耐药性研究

目的:根据肿瘤干细胞学说理论,探讨胰腺癌耐药的新机制。方法:通过胰腺癌肿瘤干细胞表面标记途径和侧群(side population,SP)细胞途径,分离出人胰腺癌细胞株PANC-1中的SP/NSP(非SP)细胞及CD44+CD24+/CD44-CD24-细胞亚群,用MTT检测上述各亚群细胞在体外对化疗药物耐受的差异,用AnnexinV-PI双染法检测2种肿瘤细胞的抗凋亡能力,并采用实时荧光定量PCR检测两者耐药基因ABCG2、ABCB1和PLK-1表达的差异。结果:人胰腺癌细胞株PANC-1中的SP细胞比例为(7.64±0.96)%,CD44+CD24+细胞比例为(2.60±0.96)%。相对于NSP和CD44-CD24-细胞而言,SP和CD44+CD24+细胞具有更强的化疗耐受能力(P0.01)和抗凋亡能力(P0.01);荧光定量RT-PCR结果均提示,SP和CD44+CD24+细胞高表达耐药基因ABCG2、ABCB1和PLK1。结论:人胰腺癌细胞株PANC-1中SP及CD44+CD24+细胞具有更强的化疗耐受能力,研究胰腺癌肿瘤干细胞可为克服胰腺癌化疗敏感性差的现状提供新的实验基础和理论依据。